Новые рекомбинантные штаммы дрожжей Yarrowia lipolytica с суперэкспрессией гена аконитат-гидратазы для получения изолимонной кислоты из рапсового масла

При лимитировании роста азотом дрожжи Yarrowia lipolytica способны к высокоинтенсивному синтезу (сверхсинтезу) лимонной (ЛК) и изолимонной (ИЛК) кислот. Соотношение синтезируемых кислот зависит от используемых шгаммов-продуцентов и определяется уровнем экспрессии аконитат-гидратазы. На основе природного штамма Y. lipolytica 672 — продуцента ИЛК сконструированы рекомбинантные варианты с суперэкспрессией мультикопийного гена аконитат-гидратазы АСО1. При последующей селекции отобран рекомбинантный штамм Y. lipolytica N° 20, у которого осуществлялся сдвиг отношения изоцитрат—цитрат в сторону ИЛК до соотношения 2,3:1 в отличие от соотношения у природного штамма Y. lipolytica 67, равного 1,1:1. При культивировании в ферментере объемом 10 л рекомбинантный штамм Y. lipolytica N° 20 синтезировал 72,6 г/л ИЛК и 29,0 г/л ЛК при соотношении изоцитрат—цитрат 2,5: 1, что позволяет считать полученный рекомбинантный штамм перспективным для использования в создании промышленного процесса получения изоцитрата.